elisa試劑盒主要設備

elisa試劑盒試劑
（1） 包被緩沖液（PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液）:
Na2CO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
（2） 洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml
（3） 稀釋液：
牛血清白蛋白（BSA） 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
（4） 終止液（3M H2SO4）：
蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。
（5） 底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:
0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml
0.1M檸檬酸（19.2克/L） 24.3ml
加蒸餾水50ml。
（6） TMB（四甲基聯苯胺）使用液:
TMB（10mg/5ml無水乙醇）0.5ml
底物緩沖液（PH5.5） 10ml
0.75%H2O2 32μl
（7） ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液（PH5.5） 1ml
3%H2O2 2μl
（8） 抗原、抗體和酶標記抗體。
（9） 正常人血清和陽性對照血清。
器材
（1） 聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標板）40孔或96孔，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。
（2） 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
（3） 4℃冰箱，37℃孵育箱。
elisa試劑盒試驗原理
試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。
自備材料
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。
elisa試劑盒安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
5． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
6． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
7． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
8． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
10． 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
11． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
12． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。